食品微生物檢驗志賀氏菌檢驗常用培養(yǎng)基原理解析
發(fā)布時間：2020-10-15 瀏覽次數(shù)：8663
?培養(yǎng)基中除胰蛋白胨、葡萄糖外，加入新生霉素作抑菌劑，并加入少量的吐溫80作增溶劑，以幫助樣品的充分分散。
?41℃厭氧培養(yǎng)有助于抑制其它雜菌生長。
2. 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基（MAC）
?利用膽鹽來抑制革蘭氏陽性細菌的生長；利用乳糖發(fā)酵，中性紅的顏色可把分解乳糖和不分解乳糖的細菌區(qū)分開。
?志賀氏菌呈無色菌落，半透明，光滑，濕潤，圓形，邊緣整齊或不齊。
麥康凱瓊脂培養(yǎng)（MAC）
3.木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽（XLD）瓊脂培養(yǎng)基
?脫氧膽酸鈉可以抑制革蘭氏陽性細菌和部分大腸桿菌，多數(shù)志賀氏菌不能發(fā)酵木糖，木糖的添加可將志賀氏菌與其它菌株區(qū)別開來，因此，志賀氏菌在XLD平板上呈現(xiàn)無色菌落，但少數(shù)發(fā)酵木糖的志賀氏菌在此平板上會被漏檢，XLD平板對宋內志賀氏菌亦有輕度抑制作用。
?志賀氏菌通常呈粉紅色至無色，半透明，光滑，濕潤，圓形，邊緣整齊或不齊菌落。
木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽（XLD）瓊脂菌落特征
?利用非志賀氏菌的特異性的酶，使其與酶底物結合形成不同顏色的菌落，而生化特性反應不活躍的志賀氏菌經(jīng)22~28h培養(yǎng)后，則形成易于識別的白色-粉紅色（與培養(yǎng)基顏色相近）的菌落。
?志賀氏菌呈白色/清晰的菌落，大小約為1～3mm，周圍培養(yǎng)基變紅。
?該培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1，只能利用葡萄糖的細菌，葡萄糖被分解產(chǎn)酸使斜面先變黃，但因量少，生產(chǎn)的少量酸。因接觸空氣而氧化，加之細菌生長利用培養(yǎng)基中含氮物質，生成堿性產(chǎn)物，故斜面后來又變紅。底部由于厭氧狀態(tài)，酸類不被氧化，仍保持黃色。而發(fā)酵乳糖的細菌，則產(chǎn)生大量的酸，使整個培養(yǎng)基呈黃色。另外，因某些細菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
三糖鐵
6.靛基質試驗
?某些細菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用顯色反應表現(xiàn)出來。吲哚與對二甲基氨基苯醛結合，形成玫瑰吲哚，為紅色化合物。
?結果判讀：陽性為滴加靛基質試劑后液面立即變玫紅色； 陰性為滴加試劑后不變紅色。
靛基質試驗
7.尿素酶試驗
?具有尿素酶的細菌分解培養(yǎng)基中的尿素，產(chǎn)生大量的氨，使培養(yǎng)呈堿性，酚紅指示劑在pH6.8時呈黃色，pH8.1呈粉紅色。
?結果判讀：陽性為玫紅色； 陰性為淡橙紅色-淡黃色。
尿素酶試驗
8.賴氨酸、鳥氨酸脫羧酶試驗
?具有氨基酸脫羧酶的細菌，能分解氨基酸使其脫羧生成胺（賴氨酸→尸胺）和二氧化碳，使培養(yǎng)基變堿，使指示劑顯示出來。
?結果判讀：陽性為試驗管為綠色-藍綠色，對照管變黃色； 陰性為試驗管和對照管均變黃色，或均不變色。
賴氨酸脫羧酶試驗陽性
9.糖（醇）發(fā)酵試驗
?絕大多數(shù)細菌都能利用糖（醇）類作為碳源和能源，但是它們在分解糖（醇）的能力上有很大的差異，有些細菌能分解某種糖（醇）并產(chǎn)酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和氣體（如氫、甲烷、二氧化碳等）；有些細菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。酸的產(chǎn)生可利用指示劑來斷定。
?（指示劑為溴甲酚紫）結果判讀：陽性為變黃色； 陰性為紫色。
甘露醇發(fā)酵試驗
10.β-半乳糖苷酶
?某些細菌可產(chǎn)生b-半乳糖苷酶，能分解鄰硝基酚-b半乳糖苷（ONPG），生成黃色的鄰硝基酚。
?結果判讀：陽性為黃色； 陰性為不變色-淡黃色。
ONPG生化管
11. 葡萄糖銨試驗
?鑒別細菌利用銨鹽作為唯一氮源并分解葡萄糖的試驗。溴麝香草酚藍是指示劑，產(chǎn)酸時培養(yǎng)基由綠色變黃色。
?結果判讀：陽性為黃色； 陰性為綠色。
葡糖糖銨利用試驗
12. 西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基
?細菌能利用檸檬酸鹽作為唯一的碳源，能在除檸檬酸鹽外不含其他碳源的培養(yǎng)基上生長，分解檸檬酸鹽生成碳酸鈉，使培養(yǎng)基變堿性。
?結果判讀：陽性為藍綠-藍色； 陰性為綠色。
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基試驗
13. 粘液酸鹽試驗
?某些細菌能利用粘液酸鹽，分解產(chǎn)酸，使培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍變黃色。
?結果判讀：陽性為黃色； 陰性為綠色-藍綠色。
粘液酸鹽試驗
